Detección de Lactobacillus plantarum 299V usando biosensores basados en microcantilevers con microscopía de fuerza dinámica

 

A. G. Mendoza-Madrigal, J. J. Chanona-Pérez, J. V. Méndez-Méndez, E. Palacios-González, G. Calderón-Domínguez, H. Hernández-Sánchez

 

 

El objetivo de este estudio fue la detección del crecimiento activo de L. plantarum 299v (microorganismo probiótico) utilizando microcantilevers como biosensores en modo dinámico en microscopía de fuerza atómica (MFA). Cantilevers comerciales se limpiaron con solución Piraña y fueron funcionalizados con solución sililada; posteriormente se recubrieron con agarosa utilizando la técnica de capilares. Un MFA en modo intermitente se utilizó para evaluar el cambio de la frecuencia de resonancia de cantilevers comerciales inoculados con L. plantarum 299v. La humedad y la temperatura se controlaron dentro de una campana atmosférica durante la biodetección. Las curvas de frecuencia de resonancia mostraron valores altos de factor Q (∼ 219). Los resultados mostraron que el desplazamiento de la frecuencia de resonancia cambia 5.2 ± 0.8 kHz en cantilevers inoculados a lo largo de la cinética de crecimiento. A partir de las curvas de frecuencia de resonancia y las propiedades mecánicas de los cantilevers, la sensibilidad del biosensor fue 383 ± 3 pg/Hz y el biosensor puede detectar ∼ 400 bacterias. El crecimiento de L. plantarum en los cantilevers se confirmó por microscopía electrónica de barrido. Los resultados mostraron que es posible la construcción de microbiosensores mediante el uso de cantilevers y MFA como plataforma para detección de microorganismos asociados a alimentos funcionales.