El ácido betulínico es un triterpeno con actividades biológicas notables; entre ellas se destacan la anticancerígena y anti-VIH. En los últimos años, las nanoemulsiones se ha utilizado como sistemas de suministro para mejorar la biodisponibilidad de compuestos bioactivos lipofílicos. En este trabajo se empleó la metodología de superficie de respuesta (RSM) mediante un diseño compuesto central para evaluar los efectos de la potencia de emulsificación, el tiempo de tratamiento con ultrasonido, y la concentración de emulsificante en las características de las nanoemulsiones con ácido betulínico. Se obtuvieron condiciones óptimas de formación de las nanoemulsiones y se probaron diferentes emulsificantes y aceites como fase dispersa. Se estudió el efecto del pH en el tamaño de globulo y el potencial zeta de las nanoemulsiones. El modelo estadístico utilizado para el tamaño de glóbulo se ajustó con eficacia a los datos experimentales con un R² de 0.94. Las condiciones de operación (potencia y tiempo de emulsificación), así como sus términos cuadráticos, tuvieron efecto significativo en el tamaño de glóbulo obtenido. Las condiciones óptimas para la formación de nanoemulsiones con un diámetro medio de 64 nm fueron 15% de emulsionante (tween 60), y una potencia de ultrasonicación de 20W durante 220s. Las nanoemulsiones con el aceite de cadena media como fase dispersa tuvieron el menor tamaño de glóbulo, sin embargo, después del almacenamiento, en las nanoemulsiones con la mezcla de aceite de cadena media: aceite de oliva, el tamaño de globulo permaneció sin cambios. La variación del pH, cambió la carga superficial del los glóbulos, se obtuvieron valores de -30 mV, y después del tiempo de almacenamiento no hubo cambio significativo en el potencial zeta.