Los cultivos de exclusión competitiva (CEC), que utilizan comunidades bacterianas enteras derivadas directamente del tracto gastrointestinal, han sido efectivos para el control de patógenos en animales, pero su aplicación a nivel humano no ha sido ampliamente estudiada. En este trabajo se cuantificó el efecto inhibitorio de sobrenadantes de un CEC desarrollado a partir de muestras fecales de individuos sanos, sobre el crecimiento de patógenos intestinales de importancia en salud pública. El Modelo de Baranyi se ajustó (R2>0.947) a las curvas de crecimiento de Shigella sonnei-(SF1), E. coli EPEC-(EC6) y Salmonella Enteritidis-(SE3) tratadas con sobrenadantes, para estimación de parámetros cinéticos. La tasa de crecimiento y la concentración de los patógenos, se redujeron significativamente (p<0.01) por acción de los sobrenadantes en 89.89% y 86.80% respectivamente, para la bacteria más sensible (SF1) y en 23.21% y 36.86% para la más resistente (SE3). Un retraso de más de 14 horas en el crecimiento de SF1 y EC6 se presentó con los tratamientos. La sensibilidad térmica y enzimática (proteinasa K y tripsina) de los sobrenadantes, indicaron que el antagonismo estuvo mediado por sustancias tipo bacteriocinas. El CEC desarrollado tiene potencial biotecnológico para la producción de sustancias antimicrobianas de interés en industria alimentaria y farmacéutica.