MARCAJE SELECTIVO DE LA PROTEíNA ALFA-SINUCLEíNA CON CLORURO DE DANSILO EN EL EXTREMO N-TERMINAL

 

M.G. Quiroz-Vázquez, A. Chávez-Montes, A. González-Horta

 

 

La mayoría de las proteínas poseen en su secuencia residuos de triptófano susceptibles de ser usados como fluoróforos para su estudio por técnicas espectroscópicas sin embargo, la alfa-sinucleína no tiene esta característica, por lo que es necesario construir mutantes que contengan triptófanos en su secuencia o bien marcarla de manera extrínseca para poder contar con sondas que permitan su análisis por espectroscopía de fluorescencia. El objetivo del presente trabajo fue optimizar las condiciones experimentales para el marcaje selectivo de la alfa-sinucleína con cloruro de dansilo, una sonda sensible a la polaridad del entorno y que reacciona selectivamente con el grupo amino libre de las proteínas lo cual permitirá caracterizar  las interacciones lípido-proteína o proteína-proteína de la alfa-sinucleína nativa en complejos lipoproteicos.