Validación de un método espectrofotométrico para cuantificación de tioles libres en Filgrastim

 

A. Guillén-García, A.V. Hernández-Moreno, V.P. Medina-Martínez, M.P. Miranda-Hernández, N.O. Pérez, C.A. López-Morales, L.F. Flores-Ortiz, F. Villaseñor-Ortega, E. Medina-Rivero

 

 

Los puentes disulfuro son modificaciones postraduccionales que proporcionan estabilidad conformacional a las proteínas y son relevantes para sus funciones biológicas. En este estudio se validó el método colorimétrico para la cuantificación de tioles libres con el reactivo de Ellman para demostrar que el Filgrastim, contenido en el medicamento Filatil®, muestra el mismo contenido de puentes disulfuro que su medicamento de referencia, tanto en condiciones nativas como desnaturalizantes-reductoras. La validación del método demostró ser adecuado para su uso intencionado. El ejercicio de comparabilidad para este atributo entre los dos medicamentos mostró que no existen diferencias significativas (p=1.000; α, 0.05) en el contenido de cisteínas libres entre los dos productos evaluados. Estos resultados aportan evidencia de similitud para este atributo, que de manera colectiva con otras características fisicoquímicas que deben evaluarse en un ejercicio de comparabilidad extendido, contribuyen a la demostración de similaridad entre las propiedades fisicoquímicas y funcionales, definidas como atributos críticos de calidad para Filgrastim de acuerdo con las guías emitidas por las agencias regulatorias.